細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊?xì)胞內(nèi)的技術(shù)。那你知道細(xì)胞轉(zhuǎn)染是如何分類的嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！

一、根據(jù)導(dǎo)入時(shí)間長(zhǎng)短進(jìn)行分類

根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)短，可以分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。

瞬時(shí)轉(zhuǎn)染（transient transfection）：指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過(guò)某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)，該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時(shí)間有限，通常僅持續(xù)幾天，直到外源基因在細(xì)胞分裂過(guò)程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。目前，由于各種轉(zhuǎn)染試劑的發(fā)明，哺乳動(dòng)物細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染已經(jīng)用于生產(chǎn)具有適當(dāng)折疊和翻譯后修飾的重組蛋白。

穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（Stable transfected）：外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠整合到宿主基因組，因此轉(zhuǎn)染細(xì)胞及其子代細(xì)胞的基因組中會(huì)同時(shí)保留轉(zhuǎn)染的DNA。由于穩(wěn)轉(zhuǎn)效率較低，因此選用有效地轉(zhuǎn)染策略和篩選方法很重要。

二、根據(jù)轉(zhuǎn)染方式進(jìn)行分類

根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可以分為化學(xué)，生物，物理方法。細(xì)胞由帶負(fù)電荷的磷脂雙分子層構(gòu)成，這對(duì)大分子物質(zhì)來(lái)說(shuō)是個(gè)不可透過(guò)的屏障，比如DNA和RNA的磷酸骨架，其也帶負(fù)電荷。為了使核酸穿過(guò)細(xì)胞膜，研究人員開(kāi)發(fā)了多種技術(shù)，大致分為三類：

化學(xué)方法：利用載體分子包被核酸使其呈現(xiàn)中性電荷或正電荷。如陽(yáng)離子脂質(zhì)體方法、磷酸鈣共沉淀法、其他陽(yáng)離子物質(zhì)介導(dǎo)等技術(shù)。

生物方法：利用基因工程病毒轉(zhuǎn)染非病毒基因到細(xì)胞中。現(xiàn)在比較多見(jiàn)的是各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。

物理方法：在細(xì)胞膜表面產(chǎn)生一個(gè)瞬時(shí)的孔從而導(dǎo)入DNA。如電穿孔法、顯微注射法。

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